メチル化シーケンス

メチル化シーケンスの利点

メチル化シトシンは時間的および空間的遺伝子発現ならびにクロマチンリモデリングを大きく変化させます。次世代シーケンサー(NGS)の力を活用して、ゲノムワイド解析とターゲットアプローチの両方により、研究者は単一ヌクレオチドレベルでのメチル化パターンの見解を得ることができます。

メチル化シーケンスの利点

  • ヒトゲノムのCpG、CHH、CHG領域のメチル化パターンを検出します
  • ゲノムワイドなアプローチである全ゲノムバイサルファイトシーケンス(WGBS)を用いて、ほとんどの種でゲノムのほぼすべてのシトシンのメチル化を確認することができます
  • 少量のDNAでサンプル多様性の全体像を捉えます
  • ターゲットメチル化シーケンスを用いて、ENCODE、FANTOM5およびエピジェノミクスロードマップコンソーシアムにより同定されたヒトゲノムの新たな関心領域をカバーします
NGSによるDNAメチル化研究の推進

このeBookは、遺伝子発現と制御の研究に関するものです。サイエンティスト達が、メチル化シーケンスとアレイ手法をどのように使って研究を発展させているかを確認しましょう。

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全ゲノムメチル化カバレッジ

バイサルファイトシーケンスの仕組み

多くのアプローチが高品質および高感度のNGSをメチル解析に活用しています。ほとんどの方法が、非メチル化シトシンの検出で、DNAのバイサルファイト変換に頼っています。バイサルファイト変換は、ライブラリー調製中に非メチル化シトシンをウラシルに変化させます。変換された塩基はシーケンスデータでチミンと同定され(PCR後)、リード数を使用してメチル化シトシンの割合が測定されます。

バイサルファイト変換シーケンスは、アンプリコンメチル化シーケンスなどのターゲット法、または全ゲノムバイサルファイトシーケンスにより行うことができます。さらに、メチル化(5-mc)解析とともにヒドロキシメチル化(5-hMc)の同定に、NGSでTAB-SeqやOxBSのような代替ケミストリーを使用できます。

メチル化解析の方法に関する詳細については、Field Guide to DNA Methylation Analysis をご覧ください。

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