MBDCap-Seq/MethylCap-Seq/MBD-Seq/MBDCap/MiGS

MBDCap-Seq/MethylCap-Seq/MBD-Seq/MBDCap/MiGS

Methyl-CpG binding domain-based capture and sequencing(MethylCap 、MBD-Seq 、MBDCap-Seq 、MBDCap)またはMBD-isolated genome sequencing(MiGS)は、タンパク質を使用してゲノム内のメチル化DNAをキャプチャします。ゲノムDNAは最初にソニケーションされ、メチル化シトシンに結合できるタグ付きMBDタンパク質と共にインキュベートされます。次に、タンパク質-DNA複合体は、タンパク質タグに特異的な抗体結合ビーズで沈殿します。ディープシーケンスは、MBD結合メチル化DNAの大部分を表す、より大きなゲノムカバレッジを提供します。

長所:
  • 高密度CpG領域およびリピート領域における5mCのゲノムワイドカバレッジ
  • MBDタンパク質は5hmCと相互作用しない
短所:
  • ゲノムワイドCpGおよび非CpGメチル化はカバーされません
  • 密度の低い5mCの領域も見逃す
  • ベースペアの解像度は、シングルベース解像度に比べて低い(~150 bp)
  • タンパク質ベースの選択は、高メチル化領域に偏っています