メソッドカテゴリー:トランスクリプトーム>RNA低レベル検出
説明: Smart-Seq2では、単一細胞は、遊離dNTPとオリゴ(dT)テールオリゴヌクレオチドを含むバッファー中で溶解され、ユニバーサル5'アンカーシーケンスを持ちます。RTが実施され、cDNA 3′末端に2~5個の未温度ヌクレオチドが付加されます。テンプレートスイッチングオリゴ(TSO)を添加し、2つのリボグアノシンと修飾グアノシンを運搬して、3’末端の最後の塩基としてLNAを生成します。一本鎖反応の後、cDNAは限られたサイクル数で増幅されます。次に、タグメンテーションを使用して、増幅されたcDNAからシーケンスライブラリーを迅速かつ効率的に構築します。
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