GMUCT 2.0
GMUCT 2.0
GMUCTは、デキャッピングされたmRNAまたは切断されたmRNAで構成されるシーケンスライブラリーを構築するための方法です。GMUCTには2つのバージョンがあります。バージョン1.0は2008年に開発され、より合理化された効率的なバージョン2.0は2013年に設計されました。GMUCT 2.0は、ライブラリー調製時間を3日（5～6日ではなく2～3日）大幅に短縮し、必要な開始総RNAは10分の1（50 μgではなく5 μg）です。
GMUCT 2.0：このバージョンは、GMUCT 1.0と同様に開始しますが、ポリ（A）RNAに5' RNAアダプターをライゲーションした後で逸脱します。ポリ（A）選択の別のラウンドは、任意の非ライゲーションRNAから目的のmRNAをさらに精製するために行われます。RTは、5'末端に3'アダプター、3'末端にランダムヘキサマーを持つプライマーを用いて行われます。この修飾によりRT中に3'アダプターが付加され、両端にアダプターが隣接するcDNA鎖が生じます。cDNAはPCR増幅され、シーケンスインデックスを追加し、シーケンスされます。
長所：
- RNA分解中間体およびキャップされていないRNAのシーケンス
- GMUCT 2.0はわずか2～3日で、トータルRNAは5 μgです
- miRNAまたはsiRNAターゲットの切断を研究するために修飾可能
短所：
- 最小サイズ：135 bp