Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichment

包括的で最新のエクソームエンリッチメントパネルを含む、高性能で高速かつ信頼性の高いヒト全エクソームシーケンスソリューションです。

6.5時間

アッセイ時間

約2時間

ハンズオンタイム

50~1,000 ngの高品質ゲノムDNA(直接血液および唾液については、リファレンスガイドを参照)

インプット量

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概要

Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Plus Enrichmentは、ヒト全エクソームシーケンス(WES)実現に向けた費用対効果が高く、信頼できるソリューションを提供します。このキットの内容:

  • 焦点を絞った包括的なカバレッジ - シーケンス結果を最大化し、焦点を絞った包括的で最新のパネルを使用してエクソームを完全にカバレッジ

  • 卓越したエンリッチメント性能 - 高いオンターゲット率と均一なカバレッジを達成しながら、マルチプレックスによりコストを削減し、サンプルスループットを向上させます 

  • 迅速で合理化されたワークフロー - DNAからライブラリー調製、エンリッチメント、エンリッチメント後の増幅までわずか6.5時間で完了。ライブラリー収量(ng)ノーマライゼーションと簡素化されたハイブリダイゼーションプロトコールを含む、迅速で使いやすいワークフロー

  • オプションのミトコンドリアゲノムエンリッチメント - スパイクインパネルでミトコンドリアゲノムカバレッジを簡単に追加

  • 自動化に優しいワークフロー - 当社のパートナーを通じて、さまざまな自動化プラットフォームの方法を見つける

単一のベンダーによるシンプルなワークフローソリューション

この全エクソームシーケンスキットには、ライブラリー調製およびハイブリダイゼーション試薬、クリーンアップ/サイズ選択ビーズ、インデックスが含まれます。このキットには、Twist Bioscience for Illumina Exome 2.5 Panelも含まれており、公開データベースで報告されたバリアントのターゲット領域カバレッジが改善されています。 

カスタマイズ可能なコンテンツ

目的のターゲット用に設計された補足的なカスタムエンリッチメントパネルを使用して、WES実験にターゲットを簡単に追加したり、重要なターゲットのカバレッジを強化したりすることができます。カスタマイズされたイルミナカスタムエンリッチメントパネルv2を、Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichmentハイブリダイゼーション反応のスパイクインとして追加します。無料のアッセイデザインツールであるDesignStudioを使用するか、イルミナコンシェルジュデザインチームのサポートを得て、カスタマイズされたWESスパイクインパネルを設計してください。

仕様

必要な製品

Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichmentキットには、ライブラリー調製、エンリッチメント、エンリッチメントプローブパネル、精製ビーズ、インデックスアダプター試薬が含まれます。必要に応じて、別のインデックスセットを選択してください。

Twist Bioscience for Illumina Mitochondrial Panelは、ミトコンドリアDNAバリアントのエンリッチメントとシーケンスを可能にするオプションの固定コンテンツスパイクインパネルです。  

直接血液をインプットするには、Flex Lysis Reagent Kitが必要です。

Infinium MIDI Heatblock Insertは、SciGene HybExマイクロヒートシステムに適合し、エンリッチメントステップに必要です。 

スパイクインパネル

Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichment Kitは、Twist Bioscience for Illumina Mitochondrial PanelまたはIllumina Custom Enrichment Panel v2とともにスパイクインパネルとして使用できます。カスタムエンリッチメントパネルは、DesignStudioデザインツールまたはイルミナコンシェルジュデザインチームを通して設計することができます。

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アプリケーション

Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichmentは、サンプルからレポート作成までのサポートを可能にする、迅速で包括的なエンドツーエンドの全エクソームシーケンスソリューションです。

ワークフローの例

1
ライブラリー調製

Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichment

3
解析

プロジェクトの推奨事項

装置 Recommended number of samples Read length
NextSeq 2000 System

Samples per run (by flow cell type): P2: 19, P3: 57 (based on 50× mean target coverage, 42M reads, 4.2 Gb of data)

2 × 101 bp

NovaSeq 6000 System

Samples per run by flow cell type: SP: 34, S1: 69, S2: 176, S4: 428 based on 50× mean target coverage, 42M reads, 4.2 Gb of data. Note: S4: 428 requires NovaSeq Xp workflow or additional indexes.

2 × 101 bp

関連するアプリケーションとメソッド

ドキュメント

製品資料

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Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichment Illumina DNA Prep with Enrichment
アッセイ時間 6.5時間 約6.5時間
自動化の詳細 利用可能な自動化方法を見る 利用可能な自動化方法を見る
コンテンツ仕様 37.5 Mbのコーディングコンテンツ(RefSeq、CCDS、ClinVarおよびACMG病原性/病原性の可能性の高いバリアントの99%以上、COSMIC Cancer Gene Census)、OMIM Custom: 0.5 - 15 Mb genomic content of interest, with Illumina Custom Enrichment Panels and Illumina Custom Enrichment Panel v2
Fixed panels: Content varies by panel.
説明 費用対効果と信頼性の高いヒト全エクソームシーケンスのための最新のエクソームコンテンツの集中エンリッチメントプローブパネルを備えた、エンリッチメントワークフローによる高速で使いやすいライブラリー調製。 低いDNAインプットやさまざまなサンプルタイプから、全エクソーム、カスタム、固定パネルターゲットシーケンスなど、さまざまな実験用のシーケンスライブラリーを約6.5時間で調製します。 
ハンズオンタイム 約2時間 約2時間, 約2時間
インプット量 50~1,000 ngの高品質ゲノムDNA(直接血液および唾液については、リファレンスガイドを参照) 高品質ゲノムDNA 10~1,000 ng、FFPE DNA 50~1,000 ng (血液および唾液については、リファレンスガイドを参照してください)。
システム NextSeq 550 Desktop Sequencer, NextSeq 2000 System, NextSeq 1000 System, NextSeq 550Dx in Research Mode, NovaSeq X System, NovaSeq 6000 System, NovaSeq X Plus System MiSeq Desktop Sequencer, iSeq 100 System, NextSeq 550 Desktop Sequencer, NextSeq 2000 System, MiSeqDx in Research Mode, MiniSeqシステム, NextSeq 550Dx in Research Mode, NovaSeq X System, NovaSeq 6000Dx in Research Mode, NovaSeq 6000 System, NovaSeq X Plus System
作用機序 ビーズ結合トランスポソーム及びハイブリッドキャプチャー化学 ビーズ結合トランスポソームおよびハイブリッドキャプチャー化学
手法 Targeted DNA sequencing, Exome sequencing, Target enrichment Custom sequencing, Targeted DNA sequencing, Exome sequencing, Target enrichment
マルチプレックス 最大12プレックスの濃縮前プーリングをテスト。キット構成は、最大192サンプルのマルチプレックスをサポートします。最大384まで可能です。 最大384のユニークデュアルインデックスを使用可能。最大12プレックスの濃縮前プーリングをテスト。
Nucleic acid type DNA DNA
オンターゲットリード 内部テストの平均パフォーマンスに基づき平均約90% エクソームパネルでは≥85%(サンプルデータセットの結果。実際のパフォーマンスは異なる場合があります)
Specialized sample types Blood, Saliva Blood, Low-input samples, FFPE tissue, Saliva
Species category ヒト Other, ヒト
テクノロジー イルミナシーケンサー イルミナシーケンサー
均一性 91%以上(5 Gbで20xのカバレッジ)内部テストの平均パフォーマンスに基づく 90%以上(4 Gbで20xのカバレッジ、エクソームパネルの場合)
バリアントクラス Single nucleotide polymorphisms (SNPs), Loss of heterozygosity (LOH), Somatic variants, Germline variants, Insertions-deletions (indels), Copy number variants (CNVs) Single nucleotide polymorphisms (SNPs), Loss of heterozygosity (LOH), Somatic variants, Germline variants, Insertions-deletions (indels), Copy number variants (CNVs)

選択ツール:

Exome 2.5パネルの性能向上

ライブラリーはIllumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichmentを使用して、1.5時間または16時間のハイブリダイゼーション時間で付属のExome 2.5 Panelまたは1.5時間のハイブリダイゼーション時間でIllumina Exome Panel(IEP, 20020183)を使用して構築および濃縮されました。NovaSeq 6000システムで濃縮ライブラリーをシーケンスし、DRAGEN Enrichment Appを用いて解析しました。

In silicoと高いデータベースターゲットカバレッジ率。

Exome 2.5 PanelおよびExome PanelのBEDファイルをリストアップされた公開データベースと比較し、重複率を測定して報告しました。 

公開データベースにおける疾患関連バリアントの優れたカバレッジ

1.5時間(オレンジ)または16時間(青)のハイブリダイゼーション時間を使用したIllumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichmentは、公開データベースの≥ 20倍のターゲットで高い平均カバレッジ率を示しています。

リソース

エクソームキット (2)

Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichment, (S) Tagmentation Set B (96 Samples, 12-plex)

20077595

Illumina DNA Prep with Enrichmentライブラリー調製および濃縮試薬、Twist Bioscience for Illumina Exome 2.0 Plus Panel、Illumina Purification Beads、IDT for Illumina DNA/RNA UD Indexes Set B、96ライブラリーの全エクソーム濃縮のためのタグメンテーション(8、12プレックス濃縮反応)が含まれます。

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Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichment, (S) Tagmentation Set D (96 Samples, 12-plex)

20077596

Illumina DNA Prep with Enrichmentライブラリー調製および濃縮試薬、Twist Bioscience for Illumina Exome 2.0 Plus Panel、Illumina Purification Beads、IDT for Illumina DNA/RNA UD Indexes Set D、96ライブラリーの全エクソーム濃縮のためのタグメンテーション(8、12プレックス濃縮反応)が含まれます。

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パネル (4)

Twist Bioscience for Illumina Mitochondrial Panel

20093180

Twist Bioscience for Illumina Mitochondrial Panel、96サンプル用の32 ulの試薬が含まれます(ハイブリダイゼーション反応8回、1反応あたり12サンプル)。このパネルは、Illumina DNA Prep with Exome 2.0 Plus EnrichmentキットのExome 2.0 Plus Panelと併用でき、ヒトエクソームとミトコンドリアDNAの両方を全ゲノムライブラリーから混ぜ合わせて濃縮することができます。Mitochondrial Panelは、Exome 2.0 Plus Panel製品の付属製品として販売されています。

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Illumina Custom Enrichment Panel V2 (32 µl, 120 bp)

20073953

Illumina Custom Enrichment Panel V2は、DesignStudioまたはConcierge Servicesを使用して、100から1,000,000プローブまでの120 bpの2本ストランドカスタムパネル設計を可能にし、32 µl(Illumina DNA Prep with Enrichmentと組み合わせて使用すると濃縮反応8回分に十分な量)の材料を提供します。別途、ライブラリー調製、濃縮、インデックスアダプター試薬を注文する必要があります。

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Illumina Custom Enrichment Panel V2 (384 µl, 120 bp)

20073952

Illumina Custom Enrichment Panel V2は、DesignStudioまたはConcierge Servicesを使用して、100から1,000,000プローブまでの120 bpの2本ストランドカスタムパネル設計を可能にし、384 µl(Illumina DNA Prep with Enrichmentと組み合わせて使用すると濃縮反応96回分に十分な量)の材料を提供します。別途、ライブラリー調製、濃縮、インデックスアダプター試薬を注文する必要があります。

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Illumina Custom Enrichment Panel V2 (1536 µl, 120 bp)

20111339

Illumina Custom Enrichment Panel V2 enables 120 bp double-stranded custom panel design from 100 up to 1,000,000 probes using DesignStudio or Concierge Services and provides 1536 µl of material (sufficient for 384 enrichment reactions when paired with Illumina DNA Prep with Enrichment). Library prep, enrichment, and index adapter reagents need to be ordered separately.

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カスタマイズ

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アクセサリー製品 (8)

Flex Lysis Reagent Kit (96 reactions)

20018706

Illumina DNA PrepおよびIllumina DNA Prep with Enrichmentで血液サンプルを処理するための試薬が含まれます。ライブラリー調製、濃縮、濃縮プローブパネル、およびインデックスアダプター試薬は別売りです。

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Illumina® DNA/RNA UD Indexes Set A, Tagmentation (96 Indexes, 96 Samples)

20091654

Illumina® DNA/RNA UD Indexes Set A, Tagmentation (96 Indexes, 96 Samples)には、96サンプルのラベリングに十分な96、10 bpのインデックスが含まれます。ライブラリー調製試薬と濃縮試薬およびプローブパネルは別売りです。

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Illumina® DNA/RNA UD Indexes Set B, Tagmentation (96 Indexes, 96 Samples)

20091656

Illumina® DNA/RNA UD Indexes Set B, Tagmentation (96 Indexes, 96 Samples)には、96サンプルのラベリングに十分な96、10 bpのインデックスが含まれます。ライブラリー調製試薬と濃縮試薬およびプローブパネルは別売りです。

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Illumina® DNA/RNA UD Indexes Set C, Tagmentation (96 Indexes, 96 Samples)

20091658

Illumina® DNA/RNA UD Indexes Set C, Tagmentation (96 Indexes, 96 Samples)には、96サンプルのラベリングに十分な96、10 bpのインデックスが含まれます。ライブラリー調製試薬と濃縮試薬およびプローブパネルは別売りです。

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Illumina® DNA/RNA UD Indexes Set D, Tagmentation (96 Indexes, 96 Samples)

20091660

Illumina® DNA/RNA UD Indexes Set D, Tagmentation (96 Indexes, 96 Samples)には、96サンプルのラベリングに十分な96、10 bpのインデックスが含まれます。ライブラリー調製試薬と濃縮試薬およびプローブパネルは別売りです。

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Infinium MIDI Heatblock Insert

BD-60-601

Nextera Flex for Enrichmentのハイブリダイゼーションステップに必要なSciGene Hybex Microheatingシステム用のヒートブロックインサートです。

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Illumina Purification Bead, 100mL

20060057

ライブラリーのクリーンアップとサイズ選択用のビーズ100 mL容器が1個含まれています。ライブラリー調製試薬および濃縮試薬、プローブパネル、インデックスは別売りです。

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Illumina Purification Bead, 400mL

20060058

ライブラリーのクリーンアップとサイズ選択用のビーズ100 mL容器4個が含まれます。ライブラリー調製試薬および濃縮試薬、プローブパネル、インデックスは別売りです。

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よくある質問

はい、10~49 ngのgDNAインプットを使用できます。しかし、このプロトコールでは、最終のプレエンリッチメントライブラリーの収量が< 50 ngにノーマライズされないため、エンリッチメント前後のライブラリーの定量化とノーマライゼーションが必要です。 

このプロトコールは、EDTA採血管に採取した新鮮血で検証されています。他の抗凝固薬を使用できますが、このキットを使用する際には保証されません。

このプロトコールは、Oragene DNA唾液採取チューブでのみ採取された唾液について検証されています。

Twist Bioscience for Illumina Mitochondrial Panelは、ミトコンドリアゲノム(chrM)の16,659塩基対(bp)と37の遺伝子をカバーするように設計された固定コンテンツパネルで、ミトコンドリアDNA(mtDNA)バリアントのエンリッチメントとシーケンスを可能にします。このパネルをIllumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichmentプロトコールのスパイクインパネルとして使用し、実験にChrMのカバレッジを追加します。

旧称Illumina DNA Prep with Exome 2.0 Plus Enrichmentは、現在、Illumina DNA Prep with Exome 2.5 Enrichment(カタログ番号 20077595および20077596)に名称が変更されています。エクソームパネルオリゴは変更されていませんが、含まれるインデックスは Illumina DNA/RNA UD インデックスに更新されました。

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NovaSeq Xシリーズの注文

進化したケミストリー、光学、インフォマティクスを融合させ、非常に優れたスピードとデータ品質、卓越したスループットとスケーラビリティをお届けします。

MiSeq Reagent Kit v3

以前のバージョンと比較して、クラスター密度とリード長が増加し、シーケンスのクオリティスコアが改善、最適化された試薬キット。

TruSight Oncology 500

すべての主要なバリアントクラスとFFPE組織からの遺伝子シグネチャ(TMB、MSIおよびHRD)をカバーする大規模な腫瘍横断型パネルでCGPを実現。

Illumina DNA Prep

幅広いシーケンス アプリケーションに対応するライブラリーを準備するための、高速で統合されたワークフロー。

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