Illumina Single Cell 3' RNA Prep

複雑なワークフローやマイクロフルイディクスを必要とせず、mRNAキャプチャー、バーコード、ライブラリー調製のための利用しやすく拡張性の高いシングルセルRNA-Seqソリューション

~15 hr from cell capture to library prep

アッセイ時間

10 mins for cell capture

ハンズオンタイム

100 to 200,000 cells

インプット量

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概要

Illumina Single Cell 3のRNAライブラリー調製キットは、簡単で拡張性が高く、マイクロフルイディクスを使用しないワークフローにより、より多くのラボでシングルセルRNAシーケンス(scRNA-Seq)を実施できるようにします。研究者は、他のシングルセルアプローチのような予算や技術上の制約なしに、より大規模でより多様なマルチオミクス研究を行うことができます。

スケーラブルで柔軟なソリューション

Illumina Single Cell 3のRNAライブラリー調製は、数百から数十万の細胞まで幅広い処理範囲に容易に拡張できます。この細胞スループットの増加により、希少な細胞タイプを明らかにする可能性がもたらされます。また、このアッセイは、サンプルマルチプレックスと並行して1つのサンプルから最大96のサンプルを実行する柔軟性もあります。

高品質な性能

Illumina Single Cell 3' RNA Prepキットは、高い転写および遺伝子感度を提供し、イルミナならではの高品質なデータを実現します。穏やかな分離技術は、他の方法では見逃されがちな脆弱な細胞の検出に役立ちます。また、このアッセイは、拡張マルチオミクスアプリケーション用のカスタムシングルセル測定と互換性があります。

利用しやすいワークフロー

Illumina Single Cell 3のRNAライブラリー調製キットは、高価なマイクロフルイディクス装置や手間のかかるプロトコールを必要としません。シンプルな手動ワークフローと柔軟な停止ポイントを使用して、ベンチトップでシングルセル研究を実施できます。

シンプルかつスケーラブルなワークフロー

3' RNA sample prep

サンプル調製

ボルテックスミキサーを使用してテンプレートエマルジョンを作成し、シングルセルmRNAをキャプチャーしてバーコード化します。

3' RNA library prep

ライブラリー調製

cDNAを生成し、シーケンス用のシングルセルライブラリーを調製します。

3' RNA sequencing

シーケンス

NGSシステムでシーケンスを行い、研究の規模に合わせます。

3' RNA analysis

解析

DRAGENおよびPartekソフトウェアを使用して、シングルセルデータを解析し視覚化します。

仕様

必要な製品

Illumina Single Cell 3' RNA Prepには、セルキャプチャーとライブラリー調製試薬の両方が含まれます。アッセイしたい細胞数に合うサイズキットを選択してください。キットは、Illumina Single Cell 3' RNA CaptureおよびIllumina Single Cell Library Prepとしても個別に入手できます。 

 

1回のランで8つを超えるサンプルのマルチプレックスを行う場合は、Illumina Single Cell Unique Dual Indexesを使用します。単一核をインプットするには、Illumina Single Cell Nuclei Isolation Kitを使用します。カスタムRNAタグシーケンスのエンリッチメントには、Illumina Single Cell Supplemental Enrichment and Amplification Kitを使用します。 

 

新規ユーザーは、必要な付属装置用にIllumina Single Cell Prep Starter Equipmentを注文する必要があります。

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アプリケーション

神経科学

神経組織は、生物の生涯を通して継続的に再編成とリモデリングを行う多様な細胞型からなる複雑な組織で構成されています。 Illumina Single Cell 3' RNA Prepは、研究者が転写感度によって神経細胞集団の真の多様性を明らかにするのに役立ち、以下に関する洞察を提供します。

  • 神経発達疾患および神経変性疾患
  • これまで知られていなかった特定のニューロン集団の役割
  • 神経免疫細胞が疾患や発達に及ぼす影響

がん研究

がんは、複雑な細胞集団が関与する動的で多様な疾患です。がんを発生させる細胞の種類と変異を理解するには、高度な方法が必要です。Illumina Single Cell 3' RNA Prepキットは、サイエンティストの次のことに役立ちます。

  • 腫瘍微小環境の細かい不均一性
  • 新しいがんバイオマーカーの同定
  • 免疫療法と薬剤耐性のメカニズムの理解

免疫学

免疫系は、病原体の同定、ターゲット化、除去に向けて連携する多様な細胞型の複雑な階層で構成されています。 Illumina Single Cell 3’ RNA Prepキットは、研究者が以下のような解析を行う際に役立ちます:

  • 免疫細胞集団における発生パスウェイと分化パスウェイの理解
  • 免疫細胞集団の役割と機能の評価
  • 病原体に対する免疫反応の研究

ワークフローの例

プロジェクトの推奨事項

装置 推奨サンプル数 リード長
NextSeq 2000システム

1ランあたりのサンプル数:
P1:1 T2サンプル
P2:4 T2サンプルまたは1 T10サンプル
P3:12 T2サンプル、3 T10サンプル、または1 T20サンプル
P4:18 T2サンプル、5 T10サンプル、または2 T20サンプル

2 x 100 bp

NovaSeq 6000システム

1ランあたりのサンプル(デュアルフローセル):
SP:18 T2サンプル、4 T10サンプル、または2 T20サンプル
S1:36 T2サンプル、8 T10サンプル、または4 T20サンプル
S2:82 T2サンプル、24 T10サンプル、10 T20サンプル、または2 T100サンプル。
S4:200 T2サンプル、68 T10サンプル、24 T20サンプル、または4 T100サンプル

2 x 100 bp

NovaSeq X Plusシステム

1ランあたりのサンプル(デュアルフローセル):
1.5B:36 T2サンプル、8 T10サンプル、または4 T20サンプル
10B:200 T2サンプル、68 T10サンプル、24 T20サンプル、または4 T100サンプル
25B:520 T2サンプル、152 T10サンプル、64 T20サンプル、または12 T100サンプル

2 x 100 bp

関連するアプリケーションと手法

ドキュメント

製品資料
サポートドキュメント

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選択ツール:

Single-cell mRNA capture and barcoding with PIPseq chemistry

PIPseqケミストリーによるシングルセルmRNAキャプチャーとバーコード化

ボルテックスミキサーを使用してテンプレートエマルジョンを作成し、シングルセルmRNAをキャプチャーしてバーコード化します。cDNAを生成し、シーケンス用のシングルセルライブラリーを調製します。NGSシステムでシーケンスを行い、研究の規模に合わせます。DRAGENおよびPartekソフトウェアを使用してscRNA-Seqデータを解析します。

High-resolution scRNA-Seq at a scale of thousands of cells

数千規模の細胞の高解像度scRNA-Seq

NIH3T3(マウス)とHEK 293(ヒト)細胞株の混合培養の効果的な分離を示すバーコードランクプロット(左)とバーンヤード散布図(右)。Illumina Single Cell 3’ RNA Prep T2キットを使用して、5%未満のマルチプレットで4106個の細胞がキャプチャーされました。

High-resolution scRNA-Seq at a scale of thousands of cells

数万規模の細胞の高解像度scRNA-Seq

凍結保存ヒト末梢血単核細胞(PBMC)のシングルセルRNA-Seq Illumina Single Cell 3ʹ RNA Prep T20キットを使用してキャプチャーした31,613の細胞のUMAPにより、多様な免疫細胞集団を分析します。

High-resolution scRNA-Seq at a scale of thousands of cells

数十万規模の細胞の高解像度scRNA-Seq

凍結組織由来のマウス脳核用のscRNA-Seq Illumina Single Cell 3ʹ RNA Prep T100キットを使用してキャプチャーした155,000個の核のUMAP解析により、多様な脳細胞集団を解析します。

リソース

サムネール

Illumina Single Cell 3' RNA Prepワークフロー

Illumina Single Cell 3' RNA Prepワークフローにより、シングルセルシーケンスにおいて、いかにシンプルかつ手頃な価格で、マイクロフルイディクス装置の必要をなくせるかをご覧ください。多様な細胞タイプにわたる実績のある性能と信頼性の高い、高品質のデータにより、シングルセルの分解能での解析がこれまでになく簡単になり、次のブレークスルーを後押しします。

Complete prep workflow products (4)

Illumina Single Cell 3' RNA Prep, T2 (8 samples, 2000 cells/sample)

20135689

Illumina Single Cell 3' RNA Prep, T2 (8 samples), includes Illumina Single Cell Library Prep plus reagents for single-cell mRNA capture, barcoding, and cDNA synthesis of up to 2000 cells per sample.

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Discounts:

Illumina Single Cell 3' RNA Prep, T10 (8 samples, 10,000 cells/sample)

20135691

Illumina Single Cell 3' RNA Prep, T10 (8 samples), includes Illumina Single Cell Library Prep plus reagents for single-cell mRNA capture, barcoding, and cDNA synthesis of up to 10,000 cells per sample.

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Illumina Single Cell 3' RNA Prep, T20 (4 samples, 20,000 cells/sample)

20135692

Illumina Single Cell 3' RNA Prep, T20 (4 samples), includes Illumina Single Cell Library Prep plus reagents for single-cell mRNA capture, barcoding, and cDNA synthesis of up to 20,000 cells per sample.

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Illumina Single Cell 3' RNA Prep, T100 (2 samples, 100,000 cells/sample)

20135693

Illumina Single Cell 3' RNA Prep, T100 (2 samples), includes Illumina Single Cell Library Prep plus reagents for single-cell mRNA capture, barcoding, and cDNA synthesis of up to 100,000 cells per sample.

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Prep component products (5)

Illumina Single Cell Library Prep (8 reactions)

20132789

Illumina Single Cell Library Prep (8 reactions), used following Illumina Single Cell 3' RNA Capture.

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Illumina Single Cell 3' RNA Capture, T2 (8 samples, 2000 cells/sample)

20132790

Illumina Single Cell 3' RNA Capture, T2 (8 samples), for single-cell mRNA capture, barcoding, and cDNA synthesis of up to 2000 cells per sample, used prior to Illumina Single Cell Library Prep.

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Illumina Single Cell 3' RNA Capture, T10 (8 samples, 10,000 cells/sample)

20132791

Illumina Single Cell 3' RNA Capture, T10 (8 samples), for single-cell mRNA capture, barcoding, and cDNA synthesis of up to 10,000 cells per sample, used prior to Illumina Single Cell Library Prep.

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Illumina Single Cell 3' RNA Capture, T20 (4 samples, 20,000 cells/sample)

20132792

Illumina Single Cell 3' RNA Capture, T20 (4 samples), for single-cell mRNA capture, barcoding, and cDNA synthesis of up to 20,000 cells per sample, used prior to Illumina Single Cell Library Prep.

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Illumina Single Cell 3' RNA Capture, T100 (2 samples, 100,000 cells/sample)

20132793

Illumina Single Cell 3' RNA Capture, T100 (2 samples), for single-cell mRNA capture, barcoding, and cDNA synthesis of up to 100,000 cells per sample, used prior to Illumina Single Cell Library Prep.

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アクセサリー製品 (4)

Illumina Single Cell Unique Dual Indexes (96 indexes, 96 samples)

20132788

Illumina Single Cell Unique Dual Indexes (96 indexes, 96 samples), optional accessory for use with the Illumina Single Cell Library Prep for high-plex pooling of libraries.

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Illumina Nuclei Isolation Kit (4 samples)

20132795

Illumina Nuclei Isolation Kit (4 samples), optional reagents for nuclei isolation, washing, and resuspension for input into Illumina Single Cell 3' RNA Prep.

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Illumina Single Cell Supplemental Enrichment and Amplification Kit

20132794

Illumina Single Cell Supplemental Enrichment and Amplification (SEA) Kit, optional reagents for use with Illumina Single Cell 3' RNA Capture and Illumina Single Cell Library Prep for custom single-cell applications.

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Illumina Single Cell Prep Starter Equipment

20132796

Illumina Single Cell Prep Starter Equipment, one-time purchase accessory equipment required to prepare Illumina Single Cell 3' RNA kits and Illumina Single Cell Library Prep kits.

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選択中の製品一覧

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よくある質問(FAQ)

Illumina Single Cell 3のRNAライブラリー調製キットは、あらかじめテンプレート化されたインスタントパーティション(PIP)を備えたPIPseqテクノロジーを使用しています。PIPは、複雑な細胞混合物を、シングルセルRNAシーケンス(scRNA-Seq)などのシングルセルアプリケーション用に簡単に処理できるバーコード付きテンプレート粒子でパーティションに分離できます。

はい、信頼できる結果を得るには、当社のボルテックスミキサーとドライバスが必要です。ボルテックスミキサーは、一貫した乳化を実現するよう設計されています。ドライバスは正確な温度プロファイルを保証します。一般的なドライバスでは、当社の溶解プロトコールで説明されているような迅速な温度変化は許容されません。

はい。細胞または核にFluent DSP/メタノール固定の実証プロトコールを使用します。パラホルムアルデヒド(PFA)固定は現在互換性がありません。

いいえ、現在3' mRNAキャプチャーのみが利用可能です。

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NextSeq 1000/2000試薬

NextSeq 1000/2000システム用の試薬は、使いやすいカートリッジ形式で提供され、柔軟なシーケンス オプションを実現する複数のフローセル構成を備えています。

NovaSeq Xシリーズ試薬キット

NovaSeq Xシリーズ用試薬キットには、試薬カートリッジ、バッファーカートリッジ、フローセル、Lyoインサート、プレロードバッファー、ライブラリーチューブストリップが含まれます。

NovaSeq 6000試薬キット

すぐに使用できる充填された試薬カートリッジとフローセルからなるNovaSeq 6000システム用試薬キットです。

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